Analysis of expression of selected stem cell markers in the fish heart.

The aim of this study was to examine whether the heart of adult fish contains endogenous undifferentiated cells which can reveal properties of stem cells, such as expression of some markers typically present or progenitor cells such as intensive proliferation. To check it, I used an immunofluorescence technique which enables detection of expression and/or location of target protein. Antibody I used can detect stem cell marker c-kit, which was widely used to identify resident cardiac stem cells in mammals. Another applied antibodies detect markers of cell divisions: KI67 and PCNA. Heart sections were also examined with respect to presence mitotic figures which are the proof of cell division.I obtained positive results in all fish heart sections for c-kit marker and negative for markers of cell divisions, except one section where KI67 antibody was used on.

Celem tej pracy było sprawdzenie czy serce dorosłej ryby zawiera potencjalne, endogenne komórki progenitorowe które mogą wykazywać cechy komórek macierzystych tj. ekspresja typowych markerów lub progenitorowych tj.duża aktywność podziałowa. Aby to zbadać zastosowano metodę barwienia immunofluorescencyjnego które pozwala wykryć ekspresję i/lub lokalizację docelowego białka w komórce. Użyto przeciwciała wykrywającego znacznik komórek macierzystych c-kit, szeroko stosowanego w badaniach sercowych komórek macierzystych u ssaków, a także przeciwciał przeciwko markerom proliferacji komórkowej KI67 oraz PCNA. Preparaty analizowano również pod kątem obecności figur mitotycznych świadczących o zachodzących podziałach komórkowych.Sygnał fluorescencyjny w tkance serca ryb, świadczący o specyficznym wiązaniu się przeciwciała do antygenu zanotowano w przypadku znacznika c-kit. Dla markerów podziałów komórkowych, a konkretnie dla znacznika KI67, tylko w przypadku jednego preparatu zaobserwowano reakcję pozytywną.