Optimization of the in vitro model for studying the interaction of ADAM10 and ADAM17 sheddases with adhesion G protein-coupled receptors (aGPCRs) and preliminary assessment of the impact of ADAM10 and ADAM17 on the release of N-terminal fragments of selected aGPCRs

Adhezyjne receptory GPCR (aGPCRs ang. adhesion G protein-coupled receptors) są zaliczane do rodziny receptorów sprzężonych z białkami G (GPCRs ang. G-protein coupled receptors). Cechą charakterystyczną aGPCRs jest duży zewnątrzkomórkowy fragment, w obrębie którego wyróżnia się domenę GAIN (ang. GPCR autoproteolysis-inducing). W jej obrębie dochodzi do autoproteolizy receptorów, ale nie jest to jedyny fragment aGPCRs, który może podlegać proteolizie. Istnieją doniesienia, które wskazują na uwalnianie N-końcowych fragmentów aGPCRs przez enzymy zewnątrzkomórkowe. Szedazy ADAM10 i ADAM17 to najlepiej poznane białka rodziny ADAM (ang. a disintegrin and metalloproteinase) zaangażowane w uwalnianie ektodomen białek błonowych. Celem niniejszej pracy była optymalizacja modelu in vitro do badań oddziaływania szedaz ADAM10 i ADAM17 z aGPCRs oraz wstępna ocena ich wpływu na uwalnianie N-końcowych fragmentów wybranych aGPCRs. Otrzymane wyniki sugerują, że ADAM17 i ADAM10 mogą uwalniać N-końcowe fragmenty LPHN1, GPR133 i BAI3. Aby określić wielkość uwalnianych ektodomen oraz wpływ ich uwolnienia na aktywność biologiczną receptorów potrzebne jest przeprowadzenie dodatkowych badań.

Adhesion G protein-coupled receptors (aGPCRs) are members of G-protein coupled receptors (GPCRs) family. A large extracellular fragment within which GPCR autoproteolysis-inducing domain (GAIN) is located is a characteristic feature of aGPCRs. Presence of GAIN domain is crucial aGPCRs auto-proteolysis, but it is not the only fragment of aGPCRs that can be subjected to proteolysis. It has been reported that N-terminal fragments of some aGPCRs may be released be extracellular proteases. ADAM10 and ADAM17 sheddases are the best characterized proteins of the ADAM (a disintegrin and metalloproteinase) family involved in the release of ectodomains from transmembrane proteins. The aim of this study was to optimize the in vitro model to study the interaction of ADAM10 and ADAM17 sheddases with aGPCRs and to assess their impact on the release of N-terminal fragments from selected aGPCRs. The results of presented experiments suggest that LPHN1, GPR133 and BAI3 may be processed by ADAM17 and ADAM10. The size of the released ectodomains and the impact of their release on the biological activity of the receptors requires additional research.