Development of an experimental model for analysis TNF production by human monocytic cell lines stimulated with the peptide BacSp222 from Staphylococcus pseudintermedius

Głównym celem pracy był wybór modelu eksperymentalnego pozwalającego na zbadanie wpływu bakteriocyny BacSp222 na produkcję TNF przez ludzkie linie monocytarne. W pierwszym etapie zoptymalizowano kanapkowy test ELISA do detekcji ludzkiego TNF. Następnie zbadano wpływ LPS na produkcję TNF przez wybrane, ludzkie linie monocytarno-makrofagowe. Ostatecznie, wybrano linię komórkową THP-1, która po różnicowaniu przez PMA i po stymulacji LPS wykazywała ekspresję TNF. W ostatnim etapie badań komórki stymulowano bakteriocyną BacSp222 i zauważono, że niezróżnicowane komórki THP-1 produkowały więcej TNF, niż komórki zróżnicowane za pomocą PMA. Co więcej, bakteriocyna BacSp222 obniżała aktywności metaboliczną zróżnicowanych komórek.

The main aim of the work was designed a model for analysis TNF expression after stimulation human monocytes cell lines with bacteriocin BacSp222. In the first stage of research the sandwich ELISA test for detection of cytokine concentrations was optimized. Then studied LPS influence on TNF production by chosen human monocyte-macrophage cell lines. Finally, THP-1 cell line, which after differentiation by PMA and stimulation LPS expressed TNF, was chosen. In the last stage of the work cells stimulated BacSp222 and noted that undifferentiated cells produced more TNF than differentiated by PMA cells. Furthermore, BacSp222 reduced the metabolic activity in differentiated cells.