The optimization of the conditions for the determination of selected fat-soluble vitamins.

Obecnie obserwowane jest rosnące zainteresowanie społeczeństwa uzupełnianiem swojej diety różnego rodzaju suplementami, m.in. zawierającymi połączenia witamin i związków mineralnych, wśród których dużą popularnością cieszą się preparaty zawierające witaminę D. Ma to zapewne związek ze zmniejszoną produkcją tej witaminy, zależną od ilości czasu spędzanego na słońcu oraz stosowaniem środków z filtrami UV. Bardzo często preparaty z cholekalcyferolem zawierają również witaminę K2, co związane jest z synergistycznym oddziaływaniem obu witamin na struktury w organizmie. Pojawia się więc pytanie o skuteczność suplementacji, czyli o jakość powszechnie dostępnych suplementy diety. W prezentowanej pracy podjęto próbę opracowania optymalnych warunków oznaczania jakościowego i ilościowego witamin D2, D3 i K2 w suplementach diety, dostępnych w postaci tabletek i proszku, z zastosowaniem techniki chromatografii cienkowarstwowej z detekcją densytometryczną. W efekcie opracowano metodykę pozwalającą na analizę trzech witamin w mieszaninie. W badaniach wykorzystano płytki TLC Silicagel F254, aktywowane 10% roztworem parafiny w cykloheksanie, które rozwijano na drodze o długości 12 cm, stosując fazę ruchomą o składzie: metanol – woda (19:1, v/v). Uzyskano dobrze rozdzielone piki witamin K2 i D o wartościach Rf: 0,18 dla witaminy K2; 0,58 dla witaminy D2 oraz 0,53 dla witaminy D3. Ustalono także optymalne warunki ekstrakcji wymienionych witamin ze sproszkowanych form produktów, z zastosowaniem metanolu jako rozpuszczalnika. Następnie opracowaną metodę poddano walidacji wyznaczając: liniowość i zakres metody, granicę oznaczalności i wykrywalności, precyzję i dokładność. Otrzymane wyniki pozwalają stwierdzić, że metoda jest wiarygodna i spełnia stawiane jej wymagania.Ustaloną procedurę wykorzystano do oznaczania zawartości witamin D3 i K2 w suplementach diety. Wykorzystując widma absorpcji i wartości współczynników Rf dokonano identyfikacji witamin; natomiast analizę ilościową przeprowadzono w oparciu o wartości pól powierzchni pików zarejestrowanych na densytogramach.Na podstawie otrzymanych wyników można stwierdzić, że oznaczona ilość witaminy D3 jest zasadniczo zbliżona do deklarowanej, natomiast ilość witaminy K2 w badanych suplementach jest zróżnicowana w stosunku do wartości deklarowanej przez producenta.

Currently, there is a growing interest of the society in supplementing their diet with various supplements, including those containing combinations of vitamins and minerals, among which preparations containing D vitamin are very popular. This is probably due to the reduced production of this vitamin, depending on the amount of time they spent in the sun and the use of UV-filters. Very often preparations with cholecalciferol also contain K2 vitamin, which is associated with the synergistic effect of both vitamins on the structures of the body. Therefore, the question arises about the effectiveness of supplementation, that means about the quality of commonly available dietary supplements. The presented work attempts to develop optimal conditions for qualitative and quantitative determinations of D2, D3 and K2 vitamins in food supplements available in the form of tablet and powder, using thin-layer chromatography with densitometric detection. As a result, a methodology for the analysis of three vitaminsin the mixture was developed. The TLC Silicagel F254 TLC plates, activated with 10% paraffin solution in cyclohexane, were developed on a 12 cm long way using a mobile phase composed of methanol-water (19:1, v/v). The well separated peaks of K2 and D vitamins with the following Rf values were obtained: 0.18 for K2, 0.58 for D2 and 0.53 for D3 vitamin. The optimal conditions of extraction of the vitamins from powdered product forms with the use of methanol as a solvent were also determined. Next, the method was validated by determining: linearity and range of the method, limit of quantification and detection, precision and accuracy. The obtained results allowto conclude that this method is reliable and meets its requirements.The established procedure was used for the determination the content of D3 and K2 vitamin in dietary supplements. Vitamins were identified using absorption spectra and Rf coefficients, while quantitative analysis was based on the values of peak surface areas recorded on densitograms. On the basis of the obtained results it can be stated, that the determined amount of D3 vitamin is substantially similar to the declared, and the amount of K2 vitamin in the analyzed supplements is varied in relation to the value declared by the producer.