Tworzenie biofilmu przez kliniczne szczepy z gatunków Streptococcus pneumoniae i Streptococcus pyogenes

Streptococci are opportunistic pathogens. Although most of them are part of the natural flora of the mucous membranes, Streptococcus play an important role in the pathogenesis of many infectious diseases. The aim of this study was to investigate the biofilm formation activity of the clinically relevant Streptococcus pneumoniae and Streptococcus pyogenes isolates.The studies were carried out on 33 clinical strains, which were identified using the serotyping test according to the Lancefield division and the Sanger sequencing and analysis of the rpoB gene. In order to study the biofilm formation activity among the tested bacterial strains, phenotypic evaluation of biofilm formation using crystal violet was used, and then a quantitative analysis was performed by measuring the absorbance (λ = 570 nm). Among the strains obtained, S. gallolyticus (n=1), S. oralis (n=1), S. pneumoniae (n=11), S. pseudopneumoniae (n=2) i S. pyogenes (n=18) were identified. The following studies showed biofilm formation in most strains. For example four strains of the species S. pneumoniae, produce it at a high level, P59, P63, P65, S62, and of the species S. pyogenes, six of the do not produce it at all or at a low level, i.e. S48, S50, S52, S54, S55, S56. The analysis of the results shows that a similar percentage of strains from the species S. pnueumoniae and S. pygoenes i.e. 37% creates a high level of biofilm. One the other hand, 27% of strains within the species of S. pneumoniae do not show the ability to build a biofilm.

Paciorkowce należą do oportunistycznych patogenów. Pomimo, że większość z nich wchodzi w skład naturalnej flory błon śluzowych, odgrywają one ważną rolę w patogenezie wielu chorób zakaźnych. Celem pracy licencjackiej była fenotypowa ocena tworzenia biofilmu in vitro przez istotne klinicznie szczepy bakteryjne z gatunków Streptococcus pneumoniae i Streptococcus pyogenes. Badania przeprowadzono na 33 szczepach klinicznych, które zostały zidentyfikowane na podstawie testu serotypowania według podziału Lancefielda oraz sekwencjonowania metodą Sangera i analizy genu rpoB. W celu zbadania aktywności tworzenia biofilmu wśród badanych szczepów bakteryjnych zastosowano fenotypową ocenę z użyciem fioletu krystalicznego, a następnie wykonano analizę ilościową poprzez pomiar absorbancji (λ = 570 nm). Wśród otrzymanych szczepów zidentyfikowano S. gallolyticus (n=1), S. oralis (n=1), S. pneumoniae (n=11), S. pseudopneumoniae (n=2) i S. pyogenes (n=18). Poniższe badania wykazały tworzenie biofilmu u większości szczepów. Na przykład cztery szczepy z gatunku S. pneumoniae tworzy go na wysokim poziomie tj. P59, P63, P65, S62, a spośród gatunku S. pyogenes 6 z nich nie tworzy go w ogóle lub na niskim poziomie tj. S48, S50, S52, S54, S55, S56. Dzięki analizie wyników można stwierdzić, że podobny odsetek szczepów z gatunków S. pneumoniae i S. pyogenes tj. 37%, tworzy biofilm na wysokim poziomie. Natomiast 27% szczepów w obrębie gatunku S. pneumoniae nie wykazuje zdolności do budowania biofilmu.