Application of flow cytometer for molecular identification of Bacillus anthracis

Flow cytometry is a method of identification biological agents that has various applications. It has been applied for identifying many types of antigens in various materials, including environmental samples. Recently it has been noticed that this method could be used for molecular detection of biological agents. The purpose of this work was to apply flow cytometry with nested-PCR for the molecular identification of B. anthracis. Paramagnetic streptavidin-coated beads were used to capture the resulting fluorophore-labeled sequences. The results show that flow cytometry can be successfully used to detect specific fluorescein- dUTP and a biotin marked sequences.

Cytometria przepływowa jest metodą identyfikacji czynników biologicznych o wielu zastosowaniach. Używano ją do wykrywania różnego rodzaju antygenów w różnych typach próbek także środowiskowych. Ostatnio metody cytometryczne zaczęto stosować w diagnostyce molekularnej czynników biologicznych. Celem tej pracy było zastosowanie metody cytometrii przepływowej i zagnieżdżonej reakcji łańcuchowej polimerazy DNA (nested -PCR) w diagnostyce molekularnej Bacillus anthracis. Użyto paramagnetyczne mikrokulki opłaszczone streptawidyną na których immobilizowany był wyznakowany fluorochromami produkt PCR. Wyniki wykazały, że metoda cytometrii przypływowej może służyć do wykrywania specyficznych sekwencji wyznakowanych fluoresceinąi biotyną.