Wstępny dobór stężenia komponentów podłoża z sacharozą do biosyntezy cytrynianu oraz inwertazy przez Yarrowia lipolytica A-101-B56-5

Przeprowadzono próbę doboru stężenia składników podłoża sacharozowego w celu otrzymania cytrynianu i inwertazy z wykorzystaniem szczepu Y. lipolytica A-101-B56-5. Skład podłóż zaprojektowano w programie Design Expert 8. Hodowle w poszczególnych podłożach przeprowadzono systemem stacjonarnym w aparacie Bioscreen C. Najlepszy plon biomasy (OD420-580nm = 1,9) uzyskano w podłożu z dużą ilością ekstraktudrożdżowego, najwyższą aktywność inwertazy zewnątrzkomórkowej (63,9 U/l) w podłożu o najwyższym stężeniu sacharozy, natomiast najwyższe stężenie cytrynianu (0,288 g/l) w podłożu o niskim stężeniu zarówno chlorku amonu, jak i ekstraktu drożdżowego (najwyższy stosunek węgla do azotu – C:N). Wykonane badania nie pozwoliły na wybór wspólnego podłoża do jednoczesnej biosyntezy wszystkich produktów, jednakże wskazały optymalne składy podłóż, które mogą być zastosowane w procesie biosyntezy wyżej wymienionych związków w hodowlach bioreaktorowych z wykorzystaniem szczepu Y. lipolytica A-101-B56-5 i sacharozy jako taniego substratu.

Influence of media components concentration was carried out for the evaluation of biosynthesis of citrate and invertase by Y. lipolytica strain A-101-B56-5 from sucrose as a cheap substrate. The concentration of components was designed in the Design Expert 8 software. All experiments were performer as batch cultures using microtiter plates in Bioscreen C apparatus. Amoung 37 media of different composition (1) the highest amount of biomass (OD420-580 nm = 1.9) was obtained in the medium with high amount of yeast extract, (2) the highest extracellular invertase activity (63.9 U/l) in the medium with the highest sucrose concentration, (3) the highest concentration of citrate (0.288 g/l) in medium where low concentration of both ammonium chloride and yeast extract were used (the high­est carbon to nitrogen ratio - C/N). No common medium was selected for simultaneous biosynthesis of all analyzed products. However, the optimum compositions of media for separate processes were obtained and may be used during biosynthesis of the compounds of interest in the bioreactor cultures using Y. lipolytica A-101-B56-5 strain and sucrose as a cheap substrate.