Kolorymetryczna metoda oceny aktywności syntetycznej lipaz

Przedstawiono wyniki badań dotyczących metody oceny aktywności syntetycznej enzymów lipolitycznych. Powszechnie znane sposoby oceny aktywności lipaz bazują w głównej mierze na reakcjach hydrolitycznych i nie są optymalne w ocenie aktywności enzymów katalizujących reakcje bezwodne. Zaproponowano metodę spektrofotometryczną opartą na reakcji transestryfikacji stearynianu winylu pentanolem. Estry winylowe są dogodnym substratem, pozwalającym przesunąć równowagę reakcji na skutek przekształcenia alkoholu winylowego w acetaldehyd. Skuteczność proponowanej spektrofotometrycznej metody oceny aktywności lipaz porównywano z wynikami chromatograficznymi. Aktywność syntetyczną zarówno handlowego preparatu immobilizowanej lipazy Candida antarctica, jak i liofilizowanych komórek drożdży Yarrowia lipolytica KKP379 porównano z aktywnością hydrolityczną w reakcji z laurynianem p-nitrofenylu jako substratem.

---

Com. Candida antarctica lipase and lyophilized cells of Yarrowia lipolytica KKP379 yeast were tested as catalysts of transesterification of vinyl stearate with pentanol. The reaction was used as test method to det. the synthetic activity of lipase. The results were compared with conventional spectrophotometric method by using p-nitrophenyl laurate as raw material. Similar results of synthetic activity of lipases were obtained for both test reactions.

---

Opracowanie rekordu w ramach umowy 509/P-DUN/2018 ze środków MNiSW przeznaczonych na działalność upowszechniającą naukę (2019).