Próba ilościowej oceny koncentracji porfiryn w układach biologicznych metodą obrazowania fluorescencyjnego

W prezentowanej pracy przedstawiono próbę podejścia do ilościowej oceny stężenia fotouczulaczy z grupy porfiryn w komórkach nowotworowych na podstawie zdjęć ich fluorescencji . Obserwowano syntezę porfiryn przez komórki nowotworowe mysiej melanomy S91 z podawanego zewnętrznie kwasu 5-aminolewulinowego (5-ALA). Fluorescencja tak zsyntetyzowanej porfiryny była obserwowana w mikroskopie fluorescencyjnym a uzyskane zdjęcia były przedmiotem analizy. Skalibrowano zależność intensywności średniej składowej R zdjęć (model RGB) od stężenia porfiryny. Pozwoliło to na korelację koncentracji fotouczulacza i obserwowanej intensywności fluorescencji w strukturach komórkowych. Uzyskane wyniki pozwoliły na ocenę ilościową stężeń fotouczalczy w badanych próbkach oraz zbadanie intensywności syntezy związku przez badane komórki. Zaproponowana metodyka może być przeniesiona na guzy nowotworowe i być pomocna w diagnostyce i praktyce klinicznej stosującej terapie fotodynamiczną.

---

The aim of this study was to determine the quantity of the protoporphyrin IX (PpIX) in S91 melanoma cells after topical administration of its precursor 5-aminolevulinic acid (5-Ala) using the photographs of PpIX fluorescence. The dependence of mean R component of the colour cell photography ( R componenet in RGB model) on porphyrin concentration was determined and used to estimate the porphyrin concentration in S91 cells on the basis porphyrin fluorescence intensity maps. The results indicate that using this method is possible to determine the dependence of quantity of the synthesized PpIX by S91 cells on the time of incubation with 5-Ala. The proposed method can be easily modified and used in determining of photosenstizers concentration in tumours.