Cellulolytic activity of regenerated protoplasts of Trichosporon cutaneum TrNU 18

Clones of regenerated T. cutaneum protoplasts varied as regards the ability to hydrolyse cellulose. The zones of substrate hydrolysis ranged from 9.0 to 18.5 mm, wilh coefficient q = 1.2-1.5. The regeneration of TrNU18 protoplasts gave isolates of enhanced cellololytic abilities. Compared with the initial strain, the most active clone had a 16% greater endoglucanase aclivily and produced 20% more biomass.

Protoplasty Trichosporon cutaneum Tr NU18 cechowały się zróżnicowaną zdolnością regeneracji na zastosowanych podłożach (tab. 2). Najkorzystniejszym środowiskiem dla odtwarzania ścianki komórkowej drożdży Trichosporon cutaneum TrNU18 okazało się podłoże syntetyczne z dodatkiem 0,5% glukozy (SG) stabilizowane za pomocą 0,8 M mannitolu. Liczba zregenerowanych tu proto-plastów wynosiła 52,7% (tab. 2). W podłożach stabilizowanych 0,8 M mannitolem proto-plasty Trichospon cutaneum odznaczały się wyższą o ok. 35% zdolnością regeneracji niż w obecności 0,8 MgSO₄ (tab. 2). Stosunkowo słabo, bo ok. 21% protoplastów regenerowało się w podłożu syntetycznym wg Maraz, w którym stabilizatorem smotycznym był 0,3 M CaCl₂ . Zregenerowane protoplasty tworzyły w podłożu minimalnym M₀ z dodatkiem 0,5% celobiozy plon biomasy z wydajnością Yp =0,4-0,6 (tab. 4). W Wyniku regeneracji protoplastów otrzymano klon TrNU18/3, który charakteryzował się korzystniejszymi właściwościami niż szczep rodzicielski TrNU18, mianowicie: podwyższeniem o 16% aktywności endoglukanazy i o 20% β-glukozydazy, wyższą o 20% produkcją biomasy (tab. 4). W protoplastach T. cutaneum zlokalizowane są niewielkie ilości enzymów celulolitycznych. Ich aktywność stanowiła od 4% do 6,8% całkowitej aktywności oznaczanej w komórkach populacji wyjściowej (lab. 5).