Wpływ saponozydu CIL-1 na żywotność, proliferację oraz migrację fibroblastów skóry ludzkiej i komórek czerniaka ludzkiego BLM.

Saponiny to niejednorodna grupa związków chemicznych należąca do glikozydów, której przedstawiciele występują głównie w królestwie roślin. Cząsteczki saponin zbudowane są z aglikonu i glikonu. Wyróżnia się dwie podstawowe struktury aglikonu: triterpenową i steroidową. Saponiny różnią się liczbą i położeniem grup funkcyjnych, ilością i miejscem występowania podwójnych wiązań oraz rodzajem i ilością cukrów.Badanych jest wiele potencjalnych zastosowań saponin w medycynie oraz farmacji. Zwiększoną popularność w ostatnich latach zawdzięczają one właściwościom przeciwnowotworowym. Dobrze udokumentowane właściwości cytotoksyczne saponin pozwalają usytuować je wśród potencjalnych kandydatów do walki z rakiem.W niniejszej pracy magisterskiej wykorzystano saponinę triterpenową CIL-1, wyizolowaną z Lysimachia ciliata w Katedrze Farmakognozji na Wydziale Farmacji Uniwersytetu Jagiellońskiego w Krakowie. Praca miała na celu sprawdzenie aktywności biologicznej CIL-1 w hodowlach in vitro, poprzez zbadanie wpływu tego związku na: żywotność, zdolność proliferacji i morfologię komórek czerniaka ludzkiego BLM i fibroblastów skóry ludzkiej (HSF). Ze względu na znaczący wpływ zjawiska migracji w tworzeniu przerzutów in vivo zbadano wpływ CIL-1 na aktywność ruchową i organizację cytoszkieletu aktynowego w komórkach BLM. Wykazano, że CIL-1 w sposób zależny od dawki i czasu inkubacji wpływa na przeżywalność i aktywność proliferacyjną obu typów komórek. Warto zaznaczyć, że wybrany typ komórek prawidłowych był zdecydowanie mniej wrażliwy na obecność związku w pożywce. Analiza ruchu komórek wykazała, że związek znacząco obniża aktywność migracyjną komórek BLM. Po wybarwieniu komórek TRITC-falloidyną zaobserwowano reorganizację cytoszkieletu aktynowego komórek hodowanych w pożywce z CIL-1 już o bardzo niskim stężeniu. Hodowla komórek w obecności saponiny wywoływała zmiany w morfologii BLM i HSF zależne od czasu inkubacji i dawki związku.Wyniki badań przedstawianej pracy magisterskiej pokazują, że wrażliwość komórek nowotworowych na badany związek jest istotnie większa niż komórek prawidłowych. Konieczne są jednak dalsze badania w celu określenia czy związek będzie mógł znaleźć zastosowanie w leczeniu nowotworów.

Saponins are heterogeneous class of chemical compounds that belongs to glycosides, they are mainly produced by plants. The molecules of saponins are combined of aglycone and glycone. The structures of aglycones are subdivided into triterpenoid and steroid. Saponins differ in respect of number and position of functional groups, number and a location where double bonds occur and the type and number of sugars.Because of their anticancer properties they have become very popular in recent years. Well documented cytotoxicity properties of saponins let us place them among the potential candidates to fight the cancer.In this work there had been used saponins triterpenoid CIL-1 which were extracted from Lysimachia ciliata in the Catherdral of Pharmacognosy in the Faculty of Fharmacy of The Jagiellonian University in Krakow. The aim of this study was to investigate the biological activity of CIL-1 in the in vitro culture by examining the impact of this compound on the viability, proliferation and morphology of the human melanoma BLM cells and the human skin fibroblasts (HSFs). Due to a significant impact of migration occurrence in formation of metastasis in vitro there was examined the impact of CIL-1 on the movement activity and the composition of the actin cytoskeleton in the BLM cells. The results indicate that CIL-1 in dependent manner in dose and time of incubation has an impact on survival and proliferative activity of both types of cells. It is worthwhile marking that the chosen type of the normal cells was significantly less sensitive to presence of the compound in the medium. Analyzes of the cells movement showed that the compound decrease motility of BLM. After staining the cells with TRICT-phalloidin there has been noted the reorganization of the actin cytoskeleton of the cells cultured in medium with CIL-1 even with the low concentration. Moreover saponin induced changes in morphology of BLM and HSF depending on time of incubation and the dose of compound.The presented results shows that the tumor cells were more vulnerable to CIL-1 than normal cells. Data reported here suggest that CIL-1 could have important potential as cancer preventive and therapeutic agents, although it still requires further research.