Zastosowanie mikroekstrakcji MEPS do analizy leków psychotropowych w ślinie pod kątem toksykologii sądowej.

The aim of this study was to apply a Micro Extraction by Packed Sorbent (MEPS) for isolation of psychotropic drugs from the oral fluid and their analysis using liquid chromatography equipped with DAD and UV spectrophotometry detectors. Strong Cation Exchanger Sorbent C8/SCX was used for extraction. Separation of the analytes was performed on C18 Spheri columns (100x4,6 mm) and C18Acclain (150x4,6 mm) at 50˚ C. A mixture of phosphate buffer (pH = 2.36) and acetonitrile in ratio 40:60 and 35:65 (v/v, depending on the instrument) were used as the mobile phase. The subject of the study were tricyclic antidepressants: doxepin, imipramine, amitriptyline, nordoxepin, desipramine and nortriptyline. A method of preliminary mixed saliva samples preparation has been elaborated for analysis during the study. Such prepared sample was sonicated for 50 minutes, spinned (3000 rpm) and then diluted with phosphate buffer (V) pH = 7.4 (2:1, v/v). 250 µl of methanol, 250 µl 0.1% formic acid were used during the micro extraction process for bed conditioning . The analytes were eluted with 200 µl of methanol:water:ammonia (25%) (94:4:1, v/v/v). Validation of the MEPS/HPLC-UV method was performed for three levels of concentrations (10, 50 and 100 ng/ml), determining its t linearity 0,021–1,0 µg/ml limit of quantitation 0,021 µg/ml and accuracy: 91,6-130,4 %. The results revealed that the developed method can be applied in determination of tricyclic antidepressants in the oral fluid for the toxicological and forensic purpose.

Celem pracy było zastosowanie mikroekstrakcji na upakowanym sorbencie (MEPS)do wyosabniania leków psychotropowychz płynu z jamy ustnej oraz ich analiza za pomocą chromatografów cieczowych wyposażonych w detektory spektrofotometryczne DAD i UV. Do ekstrakcji wykorzystano sorbent jonowymienny C8/SCX. Rozdział analitów prowadzono na kolumnach C18 Spheri (100x4,6 mm) oraz Acclain C18 (150x4,6 mm) w temperaturze 50˚C. Jako fazę ruchomą stosowano mieszaninę buforu fosforanowego (pH=2,36) i acetonitrylu w stosunku 40:60 oraz 35:65 (v/v, zależnie od aparatu). Przedmiotem badań były trójpierścieniowe leki przeciwdepresyjne: doksepina, imipramina, amitryptylina, nordoksepina, dezypraminy i nortryptylina.W ramach badań opracowano sposób wstępnego przygotowania próbek śliny mieszanej do analizy: próbkę dotowaną wymienionymi analitami poddawano działaniu ultradźwięków przez 50 minut, wirowano (3000 rpm), a następnie rozcieńczano buforem fosforanowym(V) o pH=7,4 w stosunku 2:1 (v/v). Podczas procesu mikroekstrakcji do kondycjonowania złoża używano 250 µl metanolu, 250 µl 0,1% kwasu mrówkowego. Anality eluowano 200 µl mieszaniny metanolu:wody:amoniaku (25%) (94:4:1, v/v/v).Walidację metody MEPS/HPLC–UV przeprowadzono dla trzech poziomów stężeń (10, 50 oraz 100 ng/ml), wyznaczając jej zakres liniowości 0,021–1,0 µg/ml granicę oznaczalności 0,021 µg/ml oraz dokładność: 91,6-103,4 %. Wyniki badań pozwoliły stwierdzić, że opracowana metoda może znaleźć zastosowaniew oznaczaniu trójpierścieniowych leków przeciwdepresyjnychw płynie z jamy ustnej dla celów toksykologiczno–sądowych.