Lokalizacja akwaporyny 5 w płucach świni poddanej działaniu flutamidu.

Aquaporins are present in all living organisms and their expressions dependent on the tissue. In terms their function aquaporins are divided into: aquaporins and aquaglyceroporins. First are channels for water and the second except water transport solvents like glycerol. At least 130 aquaporins and 13 channels for water were discovered.Aquaporins are integral membrane proteins which have tetrameric structure. Aquaporins are consist of 4 subunit each with a mass 28 kDa. One subunit consist of 2 segments and one segment is composed of 3 domain of the alpha helix structure. Domain are connected by loops. Loop that connects domain 2 and 3 is very conservative. This loop has a motif composed of three amino acids: asparagine- proline- arginine. Additionally, all loops are connected with alpha helix structure. Loops form a pore through which water is transported. Androgen receptor were localized in the porcine lung, which indicates that lungs are the target organs for androgens. Aquaporins are androgen dependent genes, and their’s expression is regulated by this hormon.The aim of this study was to examine the expression of aquaporin-5 in the lungs of pigs which were injected with flutamide at intervals: from 20. to 28. day (FLU 20’), from 80. to 88. day (FLU 80’) after fertilization and from 2. to. 10. (FLU PD 2) day after birth. Expression of aquaporin-5 was studied using immunohistochemical staining. Morphological changes were observed after staining of tissue hematoxylin- eosine. Immunohistochemical positive reaction was observed in all animals. In neonatal animals no changes were observed. Changes in the intensity of the reaction and tissue morphology was observed in 3- month animals. This allowed to conclude that antiandrogen flutamide has influence on expression of aquaporins genes.

Akwaporyny obecne są w komórkach wszystkich żywych organizmów, a ich ekspresja różni się w zależności od tkanki. Pod względem czynnościowym dzieli się akwaporyny na dwie grupy: prawdziwe akwaporyny i akwagliceroporyny. Pierwsze są kanałami wyłącznie dla wody, natomiast drugie oprócz wody transportują rozpuszczalniki takie jak glicerol. Odkryto już co najmniej 300 różnych akwaporyn. Natomiast w organizmie człowieka zlokalizowano co najmniej 13 typów kanałów dla wody. Akwaporyny to integralne białka błonowe o tetramerycznej budowie. Zbudowane są z 4 podjednostek, każda o masie 28 kDa. Podjednostka ta składa się z 2 segmentów, a każdy segment złożony jest z 3 domen o budowie alfa- helisy. Domeny te są połączone pętlami. Pętla łącząca domenę 2 z 3 jest bardzo konserwatywna- posiada motyw złożony z trzech aminokwasów: asparagina- prolina- arginina (NPA). Dodatkowo każda pętla połączona jest z krótką alfa- helisą. Pętle te tworzą por, przez który transportowana jest woda. W płucach wykazano obecność receptorów androgenowych, co wskazuje, że są one tkanką docelową dla androgenów. Akwaporyny są genami androgenozależnymi, których ekspresja jest regulowana przez ten hormon.Celem tej pracy było zbadanie ekspresji akwaporyny-5 w płucach świń, które poddano iniekcji flutamidem w następujących przedziałach czasowych: od 20. do 28. dnia (FLU 20’), od 80. do 88. dnia (FLU 80’) licząc od momentu zapłodnienia oraz od 2. do 10. dnia po urodzeniu (FLU PD2). Ekspresję AQP5 badano przy użyciu barwienia immunohistochemicznego. Zmiany morfologiczne obserwowano po barwieniu tkanki hematoksiliną- eozyną. U wszystkich zwierząt zaobserwowano pozytywną reakcję immunohistochemiczną. U zwierząt neonatalnych nie zaobserwowano żadnych zmian. Zmiany w intensywności reakcji oraz w budowie morfologicznej tkanki wykazano u zwierząt 3- miesięcznych. To pozwoliło na stwierdzenie, że antyandrogen jakim jest flutamid wpływa negatywnie na ekspresję genów akwaporyn.