Determination of CYP 2B1 protein expression under the influence of BDE-47.

Wstęp: Polibromowane dibenzoetery (PBDE) są powszechnie stosowane na całym świecie z powodu ich właściwości zmniejszających palność. Związki te są bardzo trwałe, mają zdolność do bioakumulacji i biomagnifikacji w łańcuchach pokarmowych. PBDE zostały wykryte w tkankach ludzi i zwierząt. Pierwsza faza metabolizmu związków tego typu odbywa się przy udziale enzymów cytochromu P450: CYP 1A1 i CYP 2B1/2.Cel pracy: Celem niniejszej pracy było określenie wpływu BDE-47 na ekspresję CYP 1A1 i CYP 2B1/2 w kokulturach komórek ziarnistych i osłonki wewnętrznej świńskich pęcherzyków jajnikowych, w zależności od dawki odczynnika oraz czasu ekspozycji.Materiały i metody: Badania przeprowadzone zostały na kokulturach komórek ziarnistych i osłonki wewnętrznej uzyskanych z pęcherzyków jajnikowych świń dojrzałych płciowo, które zostały zmieszane ze sobą w stosunku 4:1. Komórki były poddawane działaniu BDE-47 w dawkach 0,5 ng/ml, 25ng/ml i 50 ng/ml, przez 1h, 6h, 12h i 24h. Poziom białka enzymów CYP 1A1 i CYP 2B1/2 zbadano metodą Western blot.Wyniki: Zaobserwowano, że BDE-47 nie ma wpływu na ilość białka enzymów CYP 1A1 i CYP 2B1/2, niezależnie od wielkości dawki oraz czasu ekspozycji.Wnioski: Na podstawie uzyskanych wyników stwierdzono, że BDE-47 nie wpływa na ekspresję CYP 1A1 i CYP 2B1/2 w kokulturach komórek ziarnistych i osłonki wewnętrznej świńskich pęcherzyków jajnikowych.

Introduction: Polybrominated diphenyl ethers (PBDEs) are commonly used around the world because of their flame retardant properties. They are very persistent and could bioaccumulate and biomagnificate in food chains. PBDEs are known to be present in human and animal tissues. The first phase of metabolism of these compounds is mediated by enzymes cytochrome P450: CYP 1A1 and CYP 2B1/2.Object: The aim of this study was to determine the influence of BDE-47 on expression of CYP 1A1 and CYP 2B1/2 in coculture of granulosa and theca cells of porcine ovarian follicles, depending on the dose of reagent and time of exposure.Materials and methods: Experiments were conducted on cocultures of granulosa and theca cells, obtained from sexually mature pigs, which were mixed in ratio 4:1. Cells were exposed to BDE-47 at doses of 0,5 ng/ml, 25ng/ml and 50 ng/ml, for 1 h, 6h, 12h and 24h. The level of protein enzymes CYP 1A1 and CYP 2B1/2 was examined by Western blot.Results: It was observed that BDE-47 does not affect the amount of protein enzymes, CYP 1A1 and CYP 2B1/2, regardless of the dose and exposure time.Conclusions: Based on the obtained results we can conclude that BDE-47 has no effect on CYP 1A1 and CYP 2B1/2 expression in coculture of granulosa and theca cells of porcine ovarian follicles.