Expression and secretion of cPLA2 during zymosan induced peritonitis.

Zapalenie jest odpowiedzią organizmu na uszkodzenie tkanek oraz infekcję. Jest ono zjawiskiem korzystnym dla organizmu, ponieważ prowadzi do eliminacji patogenów i naprawy tkanek. Rozwój reakcji zapalnej oraz jej przebieg i zakończenie, podlegają kontroli wielu mediatorów zapalnych, zarówno pro- jak i przeciwzapalnych, a także enzymów, które umożliwiają powstanie poszczególnych grup mediatorów (jak cPLA2), oraz enzymów wpływających na przebudowę tkanek (jak MMP-9). Cytoplazmatyczna PLA2, należąca do rodziny fosfolipaz A2 ma zdolność specyficznej hydrolizy kwasu arachidonowego oraz lisofosfolipidu z fosfolipidów błonowych, umożliwiającą powstanie mediatorów lipidowych (m.in. prostaglandyn, leukotrienów). Z kolei Metaloproteinaza Macierzy Zewnątrzkomórkowej 9 (MMP-9) należy do grupy enzymów, które odpowiadają za degradację składników macierzy zewnątrzkomórkowej umożliwiając m.in. napływ leukocytów do ogniska zapalenia podczas zapalenia.Celem pracy było zbadanie powiązania pomiędzy ekspresją cPLA2 oraz MMP-9. Badania wykonano metodą immunocytochemii oraz dot blot, z wykorzystaniem myszy szczepu wsobnego C57Bl/6 oraz zwierząt z zablokowanym genem dla MMP-9 (MMP-9-/-), a także myszy kontrolnych.Badania wykazały, podczas zapalenia jamy otrzewnej wywołanego przez zymosan, produkcja cPLA2 jest podwyższona, osiągając maksimum w 6 godzinie odczynu zapalnego. Koreluje to z napływem neutrofili do jamy otrzewnej, co sugeruje, że komórki te mogą być głównym źródłem cPLA2. U myszy MMP-9-/- poziom cPLA2 na wszystkich etapach zapalenia jest istotnie niższy w porównaniu do myszy kontrolnych. Podsumowując, przeprowadzone badania pozwalają stwierdzić, że istnieje związek pomiędzy ekspresją MMP-9 a ekspresją cPLA2. Interakcje pomiędzy enzymami nie są jednak do końca poznane, dlatego niezbędne będzie przeprowadzenie dalszych, bardziej szczegółowych badań.

Inflammation is the organism's response to tissue damage and infection. This is a beneficial reaction which leads to pathogens elimination. The onset of the inflammatory response, its course, resolution and tissue repair are controled by numerous mediators, either pro- or anti-inflammatory, as well as various enzymes, either responsible for mediator production (e.g. cPLA2) or tissue remodeling (e.g. MMP-9). Cytosolic PLA2, a member of phospholipases A2 family, has an ability for specific hydrolisis of arachidonic acid and lysophospholipid from membrane phospholipids leading to formation of lipid mediators (such as prostaglandins, leukotrienes). Matrix Metalloproteinase 9 (MMP-9) belongs to proteinases responsible for degradation of extracellular matrix components facilitating leukocyte influx to the site of inflammation during inflammation.The aim of this study was to investigate the relationship between cPLA2 expression, and MMP-9. The study was performed by immunochemistry and dot blot, on samples collected from inbred C57Bl/6 mice, as well as MMP-9 gene knockout and control mice.Results revealed that during peritonitis induced by zymosan, cPLA2 production is increased, reaching a maximum at 6 h of inflammation. This result correlates with the maximal neutrophil influx into the peritoneal cavity, suggesting that these cells may be the main source of cPLA2. In MMP-9-/- mice levels of cPLA2 are significantly lower at all stages of inflammation in comparison to the control mice.In summary, the studies have shown that there is a relationship between the MMP-9 and cPLA2 expression. However, interactions between these two enzymes are still not fully understood, therefore it is necessary to perform further, more detailed studies.