Informacja

Drogi użytkowniku, aplikacja do prawidłowego działania wymaga obsługi JavaScript. Proszę włącz obsługę JavaScript w Twojej przeglądarce.

Tytuł pozycji:

Charakterystyka indukowanego światłem niebieskim ruchu chloroplastów oraz ekspresja konstruktu GFP : domena C-końcowa miozyny XI-H w liściach Nicotiana benthamiana

Tytuł:
Charakterystyka indukowanego światłem niebieskim ruchu chloroplastów oraz ekspresja konstruktu GFP : domena C-końcowa miozyny XI-H w liściach Nicotiana benthamiana
Characteristics of blue light-induced chloroplast movement and expression of GFP : myosin XI-H C-terminal domain construct in Nicotiana benthamiana leaves
Autorzy:
Borghetti, Carolina
Słowa kluczowe:
Fototropina, miozyna XI-H, Nicotiana benthamiana, ruch chloroplastów, światło niebieskie.
Blue light, chloroplast movement, myosin XI-H, Nicotiana benthamiana, phototropin.
Język:
polski
Dostawca treści:
Repozytorium Uniwersytetu Jagiellońskiego
Inne
  Przejdź do źródła  Link otwiera się w nowym oknie
Light is an energy source necessary for proper functioning of plants. It is used by chloroplasts in the light reactions of photosynthesis for production of energy-rich ATP and NADPH. Depending on the intensity of absorbed light its impact can be either beneficial or harmful. Therefore, plants have evolved mechanisms for more effective utilization of light. One of them is a blue light-controlled chloroplast redistribution which consists of an accumulation response (induced by weak light) and an avoidance response (induced by strong light). These processes are mediated by phototropins (blue light-specific photoreceptors) and motor proteins responsible inter alia for organelle trafficking along microfilaments (probably myosins).The main objectives of this work were to examine the Nicotiana benthamiana chloroplast responses to blue light and to determine the role of myosin XI-H in these relocations.It has been shown that the chloroplast movement kinetics and amplitudes are very similar for both young (2-week old) and older (6-week old) plants. Low light intensities (0,4; 1,6 μEm-2s-1) trigger the accumulation response and strong light (120 μEm-2s-1) induces the avoidance response. The velocity of the avoidance response is 5-fold higher than the accumulation reaction velocity consistent with a role of the former response in photoprotection of the photosynthetic apparatus. In contrast to A. thaliana, 20 μEm-2s-1 blue light causes a weak accumulation response in N. benthamiana.The expression of XI-H myosin was observed in A. thaliana leaves and its level did not depend on light. The construction of the expression vector pGreen-p35S-smGFP-tailXI-H-t35S allowed the expression of the fusion protein (GFP with a myosin C-terminal region) in N. benthamiana leaves. However, the expression level was too low to continue the research, in particular to verify a possible contribution of myosin XI-H in the mechanism of chloroplast movements.

Światło stanowi dla roślin źródło energii niezbędnej do prawidłowego funkcjonowania. Wykorzystywane jest przez chloroplasty w fazie jasnej fotosyntezy do produkcji wysokoenergetycznych ATP oraz NADPH. W zależności od natężenia absorbowanego światła jego wpływ może być zarówno dobroczynny jak i szkodliwy. Rośliny wykształciły zatem mechanizmy pozwalające na jego wykorzystanie w sposób jak najbardziej wydajny. Jednym z nich jest aktywowany światłem niebieskim ruch chloroplastów, na który składają się reakcja akumulacji (indukowana światłem słabym) oraz ucieczki (indukowana światłem silnym). W procesach tych pośredniczą fototropiny (receptory światła niebieskiego) oraz białka motoryczne odpowiedzialne m.in. za transport organelli wzdłuż mikrofilamentów (prawdopodobnie miozyny).Do głównych celów niniejszej pracy należało zbadanie reakcji ruchowych chloroplastów Nicotiana benthamiana w odpowiedzi na światło niebieskie oraz określenie stopnia udziału miozyny XI-H w tych przemieszczeniach.Wykazano, że kinetyka oraz amplitudy odpowiedzi ruchowych dla roślin młodych (2-tygodniowych) oraz starszych (6-tygodniowych) są bardzo zbliżone. Podobnie jak w Arabidopsis thaliana światło słabe (0,4; 1,6 μEm-2s-1) wywołuje reakcję akumulacji chloroplastów natomiast silne (120 μEm-2s-1) reakcję ucieczki, przy czym szybkość reakcji ucieczki jest 5-krotnie większa, zgodnie z jej rolą w ochronie aparatu fotosyntetycznego. W przeciwieństwie do A. thaliana, w przypadku N. benthamiana światło niebieskie o natężeniu 20 μEm-2s-1 wywołuje słabą reakcję akumulacji.W liściach A. thaliana wykazano ekspresję miozyny XI-H, której poziom nie zależy od światła. Skonstruowano wektor ekspresyjny pGreen-p35S-smGFP-ogonXI-H-t35S, następnie w liściach N. benthamiana uzyskano ekspresję białka fuzyjnego składającego się z białka reporterowego GFP oraz C-końcowej domeny miozyny XI-H. Poziom ekspresji był jednak zbyt niski na kontynuację badań, w tym weryfikację możliwego udziału miozyny XI-H w mechanizmie ruchu chloroplastów.

Ta witryna wykorzystuje pliki cookies do przechowywania informacji na Twoim komputerze. Pliki cookies stosujemy w celu świadczenia usług na najwyższym poziomie, w tym w sposób dostosowany do indywidualnych potrzeb. Korzystanie z witryny bez zmiany ustawień dotyczących cookies oznacza, że będą one zamieszczane w Twoim komputerze. W każdym momencie możesz dokonać zmiany ustawień dotyczących cookies