Ekspresja β-kateniny w ciałku żółtym ciężarnej świni po zastosowaniu antyandrogenu.

Ciałko żółte (CL) jest przejściowym gruczołem dokrewnym powstającym ze ściany pęcherzyka jajnikowego po owulacji. Wytwarza ono progesteronu (P4) niezbędny do przygotowania dróg rodnych samicy na przyjęcie zarodka i utrzymania ciąży. W CL można wyróżnić duże (DL) i małe (ML) komórki lutealne, które różnią się zdolnością do sekrecji P4 i wrażliwością na czynniki regulujące czynność CL oraz komórki nielutealne. CL w zależności od gatunku jest aktywne przez cały okres ciąży lub do czasu, gdy łożysko przejmie jego funkcję. Pozostaje ono pod kontrolą szeregu czynników luteotropowych i luteolitycznych syntetyzowanych przez przysadkę, jajniki, macicę, łożysko i zarodek. Białkiem niezbędnym dla prawidłowego rozwoju i funkcjonowania jajnika jest β-katenina. Białko to uczestniczy zarówno w tworzeniu połączeń adhezyjnych jak i w regulacji ekspresji genów jako koaktywator dla wielu czynników transkrypcyjnych, w tym dla receptora androgenowego (AR). W komórkach lutealnych niektórych gatunków ssaków β-katenina zaangażowana jest w syntezę P4. Celem przedstawionej pracy było zbadanie wpływu antagonisty AR - flutamidu, na ekspresję β-kateniny w CL ciążowych świń poddanych działaniu antyandrogenu w różnych okresach ciąży: 43-49 (50 dpc), 83-89 (90 dpc) i 101-107 (108 dpc) dnia po zapłodnieniu. Lokalizację β-kateniny w komórkach lutealnych badano metodą immunohistochemiczną. Techniką Western blot analizowano ekspresję tego białka w homogenatach CL oraz w poszczególnych subkomórkowych frakcjach białkowych. Pozytywną reakcję immunohistochemiczną obserwowano w obszarze przybłonowym w DL oraz w błonie, cytoplazmie i jądrze komórkowym w ML. Analiza intensywności barwienia immunohistochemicznego wykazała spadek ekspresji β-kateniny w DL u świń z grup eksperymentalnych 90 i 108 dpc w porównaniu ze zwierzętami kontrolnymi. Analiza Western blot wykazała wzrost zawartości β-kateniny w przedziale jądrowym CL z grupy eksperymentalnej 108 dpc oraz spadek ekspresji tego białka w cytoplazmie CL z grupy eksperymentalnej 90 dpc, a także w całych homogenatach CL z grup eksperymentalnych 90 dpc i 108 dpc w porównaniu ze zwierzętami kontrolnymi. Przedstawiona praca jako pierwsza prezentuje dystrybucję komórkową β-kateniny w CL ciężarnej świni. Jej wyniki wskazują również na znaczenie androgenów w regulacji ekspresji tego białka w CL świni w późnej ciąży i okresie okołoporodowym.

The corpus luteum (CL) is a transient endocrine gland that forms from the ovarian follicle after ovulation. It secretes progesterone (P4), which is required to prepare female reproductive tracts for implantation and maintenance of pregnancy. The CL consists of two distinct types of luteal cells: large (LL) and small (SL) cells that differ in their steroidogenic activity and their responsiveness for regulatory factors and nonluteal cells. Depending on the species, the CL is the major source of P4 throughout the entire gestation or becomes replaced with placenta. The CL’s activity is controlled by numerous luteotropic and luteolytic factors derived from the pituitary gland, ovaries, uterus, placenta and embryo.The protein that is crucial for normal ovarian function is β-catenin. β-catenin participates in both cell adhesion and regulation of gene expression as a transcription coactivator for numerous transcription factors, including androgen receptor (AR). In many mammals β-catenin is involved in P4 production in luteal cells.This study aimed to test whether exposure to an antagonist of AR – flutamide, affected β-catenin expression in the CLs of pregnant pigs. The antiandrogen was injected into pregnant gilts between days 43 and 49 (50 dpc), days 83 and 89 (90 dpc), or days 101 and 107 (108 dpc) of gestation. To determine β-catenin localization in luteal cells immunohistochemical analysis was conducted. The protein concentration in subcellular fractions and homogenates of porcine CLs was analyzed by Western blot. The positive immunoreaction of β-catenin was observed in membranes of LLs. Membranous, cytoplasmic and nuclear β-catenin expression was detected in SLs. The measurement of immunoreaction intensity revealed that β-catenin abundance was decreased in LLs of flutamide-treated animals in the 90 dpc and 108 dpc groups as compared with the respective controls. Western blot results showed upregulation of nuclear β-catenin expression in the 108 dpc group and downregulation of cytoplasmic β-catenin expression in the 90 dpc group after flutamide exposure. β-catenin abundance was also reduced in homogenates of porcine CLs in experimental groups 90 and 108 dpc when compared with control animals. This is the first study demonstrating distribution of β-catenin within the luteal cells of porcine CL of pregnancy. The presented study also provides evidence that androgens are involved in the regulation of β-catenin expression in porcine CL during late pregnancy and preparturient period.