Opracowanie procedury oznaczania leków psychotropowych oraz substancji aktywnych z grupy dopalaczy w materiale biologicznym metodami CE-LIF i CE-MS

The aim of this thesis was to developed, optimize and validate a derivatization procedure and separation method for the determination of 7-amino-clonazepam, benzylpiperazine, ephedrine and α-methylbenzylamine in standard solutions. As an optimal concentration of derivatization buffer was chosen 50 mM borate buffer. The final derivatizations were performed with 12,5 concentration of FITC ratio to 1 concentration of analyte. The reaction solution was allowed to stand at room temperaturę (22oC) in the dark for 24 h. A simple electrophoretic buffer system composed of 50 mM borate buffer with addition of acetonitrile (20%). The CE-LIF method was validated by assessing the following parameters: linearity, sesnsitivity, precision, LOD, LOQ.The socond part of this thesis MAE/CE-MS method was examined an influence of biological matrix of serum and hair to determination of benzylpiperazine, tetrazepam, 7-amino-clonazepam, diazepamm, alprazolam estazolam, clonazepam and lorazepam. Developed method is precise repeatable and accurate. Parameters such as recovery (RV) and matrix effect (ME) confirmed low influence for the determination replaced substances.

W ramach niniejszej pracy magisterskiej opracowano procedurę oznaczania 7-aminoklonazepamu, benzylopiperazyny, efedryny oraz α-metylobenzyloaminy, metodą CE-LIF. Badania wykonano na próbkach wodnych roztworów wzorcowych analitów. Zoptymalizowano warunki procesu derywatyzacji, które stanowił 50 mM roztwóru tetraboranu sodu wchodzący w skład środowiska derywatyzacji, stosunek stężeń FITC do stężenia analitu wynosił 12,5:1. Czas potrzebny na przeprowadzenie analitów w ich fluoryzujące pochodne to 24 godziny w temperaturze pokojowej (22oC). Za optymalny bufor separacyjny uznano 50 mM buforu boranowy w mieszaninie z acetonitrylem w stosunku objętościowym 80:20. Walidacja metody CE-LIF pozwoliła orzec, że opracowana metoda charakteryzuje się dużą czułością, precyzją i powtarzalnością oraz pozwala na wykrywanie i oznaczanie wymienionych substancji na niskich poziomach stężeń. W drugiej części pracy zbadano wpływ matrycy biologicznej od surowicy i włosów, na oznaczanie benzylopiperazyny, 7-aminoklonazepam, klonazepam, tetrazepam, diazepam, alprazolam, estazolam i lorazepam, uprzednio zoptymalizowaną metodą MAE/CE-MS. Metoda charakteryzuje się dobrą precyzją, powtarzalnością oraz dokładnością. Parametry odzysku (RV) i efektu matrycy (ME) potwierdzają, że wspomniana matryca biologiczna nie wpływa znacząco na oznaczenia wymienionych związków.