Hamowanie aktywności porotwórczej lyzeniny i białek lyzeninopodobnych poprzez pułapkowanie na filmach lipidowych wzbogaconych w sfingomielinę

The work concerns with inhibition of hemolytic activity of coelomic fluids derived from two species of earthworms on the lipids film with controlled composition. The influence of sphingomyelin alone no that activity was also estimated. The effects were measured with hemolysis, by detecting spectrophotometrically the increasing release of hemoglobin into medium. Sheep erythrocytes were used. The experiments were performed on specimens belonging to Eisenia fetida and Eisenia andrei as well as on the specimens derived from hypothetical cross-breed of these species.The experiments performed resulted in very effective inhibition of hemolytic activity of pore-forming proteins following the incubation on films enriched in sphingomyelin, both with other mebrane components (cholesterol and phosphatidylcholine) and sphingomyelin alone.

Praca poświęcona jest hamowaniu aktywności hemolitycznej płynów celomatycznych z dwóch gatunków dżdżownic przez inkubację na filmach lipidowych o kontrolowanym składzie, wzbogaconych w sfingomielinę. Oceniano także wpływ samej sfingomieliny wprowadzonej do roztworu płynu celomatycznego jednego z wybranych gatunków. Badano spektrofotometrycznie aktywność białek porotwórczych, za pośrednictwem rosnącego w roztworze stężenia hemoglobiny uwalnianej w wyniku dziurawienia erytrocytów owczych przez białkowe toksyny. Spadek sygnału absorbancji interpretowano jako efektywne pułapkowanie protein porotwórczych lub ich całkowite zahamowanie.Wykonano doświadczenia kontrolne inkubując wydzieliny: E.andrei (EA) E.fetida (EF-) i jej hipotetycznym podgatunku(EF+) na błonach modelowych zawierających w cholesterol oraz lipidy jaja kurzego, następnie na błonach wzbogaconych w sfingomielinę. W każdym z kolejnych eksperymentów korzystano z płynu od innego osobnika tego samego gatunku. W drugiej części doświadczenia przeprowadzono próbę zahamowania aktywności płynu E.fetida samą sfingomieliną kontrolując jej ilość w mieszaninie. W tym celu sporządzono roztwór płynu E.fetida z różną objętością sfingomieliny. Doświadczenia z modelowymi błonami wykazały że filmy lipidowe wzbogacone w sfingomielinę doskonale hamują aktywność hemolityczną wydzielin E.fetida, E.andrei. Wynik doświadczenia z mieszaniną sfingomieliny o różnej objętości z płynem E.fetida pozwolił postawić hipotezę że sama sfingomielina jest wstanie zatrzymać aktywność wszystkich hemolitycznych białek występujących w wydzielinie tego gatunku.