Ocena wpływu HO-1 i czynnika transkrypcyjnego Nrf2 na stres oksydacyjny i reakcję zapalną w śródbłonku aorty w hodowlach in vitro po podaniu Ang II

Current studies have shown that endothelium damage or chronic endothelium inflammation are responsible for many vascular diseases. Some studies indicated that angiotensin II – hormone responsible for elevating blood pressure but also inflammation and oxidative stress inductor, may play a role in the cardiovascular diseases. During oxidative stress increased activation of heme oxygenase and Nrf2 transcription factor is observed. The purpose of this study was to investigate if elevated HO-1 expression and Nrf2 activation play role in response for ang II induced oxidative stress in aortic endothelial cells. Cells were incubated with Ang II (at concentrations from 0.5 to 300 nM) in order to measure gene expression level of HMOX1 and NQO1 (a marker of Nrf2 activation) These measurements were made by usage of Real – Time PCR method. In order to measure HO-1 protein level in cells Western Blot technique was used. Received results suggest that angiotensin II has little effect on HO-1 and Nrf2 in human endothelial cells.

Obecne badania wskazują, iż za wiele chorób układu krążenia odpowiada uszkodzenie śródbłonka lub podtrzymujący się w nim stan zapalny. Jako czynnik przyczyniający się do rozwoju tych patologii wskazuje się angiotensynę II (Ang II) – hormon odpowiedzialny za podnoszenie ciśnienia krwi w naczyniach, jak również indukujący stres oksydacyjny i stan zapalny. W mechanizmach aktywnej odpowiedzi na stres oksydacyjny w komórce biorą udział m. in. czynnik transkrypcyjny Nrf2 oraz enzym oksygenaza hemowa-1 (HO-1) wykazująca również właściwości przeciwzapalne. Celem tej pracy było ustalenie czy zwiększenie ekspresji HO-1 lub aktywacja czynnika Nrf2 odgrywa rolę w odpowiedzi na stres oksydacyjny komórek śródbłonka aorty wywołany przez Ang II. W trym celu pochodzące z hodowli in vitro ludzkie komórki śródbłonka poddawano inkubacji z Ang II (w dawkach od 0,5 do 300 nM), a następnie badano zmiany ekspresji genu HMOX1 oraz NQO1 - będącego wskaźnikiem aktywacji Nrf2 - przy pomocy metody Real-Time PCR. W celu określenia poziomu HO-1 w komórkach posłużono się również metodą Western Blot. Otrzymane wyniki wskazują, iż angiotensyna II nieznacznie wpływa na stężenie HO-1 w komórkach śródbłonka oraz na aktywację Nrf2.