Ekspresja receptora folitropiny w pęcherzykach jajnikowych dojrzałej płciowo świni po ekspozycji na związki o aktywności hormonalnej w okresie neonatalnym

Odpowiedni poziom androgenów i estrogenów w okresie neonatalnym jest warunkiem prawidłowego rozwoju pęcherzyków jajnikowych oraz zachowania płodności u osobnika dojrzałego płciowo. Wraz z rozwojem cywilizacyjnym wzrasta w środowisku ilość związków o aktywności hormonalnej (ECAs). Wykazują on działanie agonistyczne lub antagonistyczne w stosunku do endogennym hormonów steroidowych, a liczne badania przeprowadzone w ostatnim czasie wskazują na ich negatywny wpływ na rozrodczość. Związki te mogą wpływać na ekspresję receptora folitropiny (FSHR), a tym samym zaburzać działanie FSH, który odgrywa kluczową rolę w procesie folikulogenezy. Dlatego celem niniejszej pracy było zbadanie ekspresji FSHR na poziomie mRNA oraz immunolokalizacja tego receptora w pęcherzykach przedantralnych oraz małych pęcherzykach antralnych. Pęcherzyki te pochodziły z jajników dojrzałych płciowo świń, które w okresie neonatalnym traktowane były związkami o aktywności androgennej (propionian testosteronu; TP), antyandrogennej (flutamid; FLU) lub mieszanej: antyandrogennej, estrogennej oraz antyestrogennej (metoksychlor; MXC). Neonatalne świnie podzielono na cztery grupy doświadczalne, którym podawano kolejno: TP (20 mg/kg masy ciała), FLU (50 mg/kg masy ciała), MXC (20 µg/kg masy ciała) oraz olej kukurydziany z DMSO (grupa kontrolna) pomiędzy 1. a 10. dniem po urodzeniu. Zwierzęta hodowano do osiągnięcia dojrzałości płciowej i pomiędzy 8. a 11. dniem cyklu, pobrano od nich jajniki, z których wyizolowano pęcherzyki jajnikowe, na których przeprowadzono analizę real-time PCR i reakcję immunohistochemiczną. Analiza real-time PCR wykazała wzrost ekspresji FSHR na poziomie mRNA w pęcherzykach przedantralnych po zastosowaniu TP. Spadek ekspresji FSHR odnotowano natomiast w małych pęcherzykach antralnych w grupie traktowanej MXC. FSHR zlokalizowano w warstwie komórek ziarnistych i w oocytach pęcherzyków przedantralnych we wszystkich badanych grupach. W małych pęcherzykach antralnych FSHR zlokalizowano w warstwie ziarnistej pęcherzyka.Zmiany w ekspresji receptora FSH w pęcherzykach przedantralnych i małych antralnych wywołane neonatalnym narażeniem na związki o aktywności hormonalnej mogą zaburzać prawidłową folikulogenezę, a także steroidogenezę u świni. Wyniki wskazują na długotrwałe efekty zaburzenia działania steroidów w okresie neonatalnym spowodowanych ekspozycją na związki o aktywności androgennej oraz metoksychlor na funkcje jajnika świni. W konsekwencji może to prowadzić do zmniejszenia płodności.

Normal levels of androgens and estrogens play an important role in the development of ovarian follicles and the preservation of fertility in sexually mature animals. With the development of civilization, the number of compounds with hormonal activity (ECAs) increases in the environment. These compounds are agonists or antagonists in relation to endogenous steroid hormones. Recent studies show their negative effects on reproduction. These compounds affect the expression of the FSHR and the function of FSH which plays a important role in folliculogenesis. The aim of this research was to study the expression of FSHR and immunolocalization of this receptor in preantral and small antral follicles. These follicles were isolated from ovaries of sexually mature pigs. These pigs in the neonatal period were treated with compounds with androgenic activity (testosterone propionate, TP), antiandrogenic (flutamide, FLU) and mixed: antiandrogenic, estrogenic and antiestrogenic (methoxychlor; MXC). In this study were used real-time PCR and immunohistochemical staining. Neonatal pigs separated on four experimental groups and treated between the 1st to the 10th day after birth: TP (20 mg / kg body weight), FLU (50 mg / kg body weight), MXC (20 μg / kg body weight) and corn oil with DMSO (control group). Sexually mature animals were killed and isolated ovaries with follicles between days 8 and 11 of the cycle. Real-time PCR analysis showed increase expression of FSHR in preantral follicles after TP treatment. The decrease in expression of FSHR was observed in antral follicles in the MXC treated group. FSHR has been localized in granulosa cells and in cytoplasm of oocytes in preantral follicles. In small antral follicles FSHR were located in granulosa cells. Changes in FSH receptor expression in preantral and small antral follicles induced by neonatal exposure to compounds with hormonal activity may interfere with folliculogenesis and steroidogenesis in the pig. The results indicate long-term effects of steroid dysfunction in neonatal period caused by exposure to compounds with androgenic activity and methoxychlor on porcine ovary functions. As a consequence, it may reduce fertility.