Immunoekspresja białek szlaku steroidogenezy po prenatalnej ekspozycji na flutamid samic nornicy rudej

In this study, the influence of a nonsteroidal antiandrogen called flutamide on the morphology and function of bank vole ovaries (Clethrionomys glareolus S.) was investigated. Flutamide was administreted to pregnant bank voles at day 5. of gestation. The study was performed on the ovaries obtained from 3-months old bank voles (first generation), which were kept in a long photoperiod. In order to evaluate the possible impact of flutamide on the ovarian development, serial sections were stained with hematoxylin and eosin, while immunohistochemistry was used to reveal androgen receptor (AR) and 3β-hydroxysteroid dehydrogenase enzyme (3β-HSD) localization. The content of steroid hormones in ovarian homogenates was established by a radio immunoassay (RIA). In bank voles treated with flutamide in utero significant differences in ovarian morphology have been observed. There number of ovarian follicles was smaller and there was delay in their development, when compared with the control. Flutamide also caused the presence of a greater number of atretic follicles. Surprisingly, in bank voles treated with flutamide the presence of corpora lutea was observed, which suggests the occurrence of spontaneous ovulation, likely induced by that antiandrogen. Immunohistochemical analysis indicated lower immunoexpression of AR and 3β-HSD enzyme in the experimental group. Nuclear immunoexpression of AR was found in granulosa, theca and interstitial cells and in cells of the epithelium surface, whereas cytoplasmic immunoexpression of 3β-HSD enzyme was observed in interstitial and thecal cells as well as in the oocytes (but only in the experimental group). Additionally, measurements of steroid hormone levels in ovarian homogenates have shown higher content of steroids in bank voles prenataly exposed to flutamide than in control animals. The dominant hormone was progesterone.

W niniejszej pracy badano wpływ niesteroidowego antyandrogenu - flutamidu podawanego prenatalnie w V dniu ciąży na morfologię oraz funkcję jajnika nornicy rudej (Clethrionomys glareolus S.) I pokolenia. Do badań wykorzystano jajniki pobrane od 3-miesięcznych nornic hodowanych w warunkach dnia długiego (DD). Aby ocenić ewentualny wpływ flutamidu na rozwój struktur tkanki jajnika wykonano standardowe barwienie hematoksyliną oraz eozyną, a barwieniem immunohistochemicznym uwidoczniono rozmieszczenie receptora androgenowego AR (ang. Androgen Receptor) oraz enzymu 3β-HSD (ang. 3β-hydroxysteroid dehydrogenase). Zawartość hormonów steroidowych w homogenatach jajników zmierzono metodą RIA. U nornic traktowanych in utero flutamidem zaobserwowano znaczące różnice w morfologii jajników, mniejszą liczbę pęcherzyków oraz wyraźne opóźnienie ich rozwoju w porównaniu z jajnikami samic kontrolnych. Flutamid powodował również występowanie większej liczby pęcherzyków atretycznych, w porównaniu do kontroli. Zaskakująco u nornic nastrzykiwanych flutamidem wykazano obecność ciałek żółtych, co wskazuje na wystąpienie spontanicznej owulacji, najprawdopodobniej indukowanej działaniem antyandrogenu. Analiza immunohistochemiczna wykazała obniżenie immunoekspresji AR oraz enzymu 3β-HSD u zwierząt z grupy doświadczalnej. Jądrową immunoekspresję AR obserwowano w komórkach ziarnistych, osłonki wewnętrznej, interstycjalnych oraz w komórkach nabłonka powierzchniowego, podczas gdy cytoplazmatyczną immunoekspresję enzymu 3β-HSD w komórkach interstycjalnych, osłonki wewnętrznej oraz w oocytach, (ale tylko w grupie doświadczalnej). Dodatkowo pomiary zawartości hormonów steroidowych, w homogenatach jajników, wykazały ich wyższą zawartość u nornic wystawionych na działanie flutamidu. Dominującym hormonem był progesteron.