Wpływ inhibitora kinazy białkowej Aurora A MK-8745 na żywotność wybranych linii komórek neuroblastoma - badania in vitro

Neuroblastoma to złośliwy nowotwór wieku dziecięcego. Przyczyna choroby nadal nie jest do końca poznana, dlatego wciąż trwają badania majace na celu ustalenie tej kwestii. Jednym z kierunków badań jest skupienie się na czynniku transkrypcyjnym MYCN, którego amplifikacja bardzo często występuje w komórkach neuroblastoma. Może być to wynikiem działania białka Aurora A, któro uniemożliwia degradację MYCN. W ekperymencie będącym tematem niniejszej pracy, badano jeden z inhibitorów kinazy AuroraA - MK8745. Idealną sytuacją byłoby, gdyby inhibitor ten uniemożliwiał tworzenie się kompleksu Aurora A i MYCN, przez co doszłoby do degradacji czynnika transkrypcyjnego, co zatrzymałoby cykl komórkowy, zahamowałoby nadmierną proliferację i doprowadziło do apoptozy komórek nowotworowych. W tym celu wykonano eksperyment na dwóch liniach komórkowych neuroblastoma - CHP-134 i Kelly. W badaniu zastosowano pomiar chemiluminescencji metodą ATPlite w celu określenia żywotności komórek wystawionych na działanie inhibitora. Efekt obniżenia żywotności zaobserwowano przy zastosowaniu stężeń od 0,1μM do 0,5 μM dla obu linii, w stosunku do komórek kontrolnych. Oznacza to, że w liniach neuroblastoma CHP-134 oraz Kelly zastosowanie inhibitora kinazy Aurora A powoduje spadek poziomu ATP w komórkach tych linii. W celu wysunięcia dalszych wniosków należałoby powtórzyć eksperyment, z wykorzystaniem innych linii komórek neuroblastoma, a także przeprowadzić bardziej wnikliwą analizę statystyczną. Pozwoliłoby to na bardziej szczegółowe ukierunkowanie dalszych badań nastawionych na znalezienie leków na neuroblastoma.

Neuroblastoma is a malignant tumor of childhood. The cause of the disease is still not fully understood, and there are still studies to determine this issue. One of the research directions is to focus on the MYCN transcription factor, whose amplification is very common in neuroblastoma cells. This may be due to the Aurora A protein, which prevents MYCN degradation. In the experiment being the subject of this study, one of the AuroraA kinase inhibitors - MK8745 was studied. The ideal situation would be if this inhibitor prevented the formation of the Aurora A and MYCN complex, which would degrade the transcription factor, which would stop the cell cycle, inhibit excessive proliferation and lead to apoptosis of cancer cells. For this purpose, an experiment was performed on two neuroblastoma cell lines - CHP-134 and Kelly. The study used chemiluminescence measurement using the ATPlite method to determine the viability of cells exposed to the inhibitor. The effect of reducing viability was observed when using concentrations from 0.1 μM to 0.5 μM for both lines, relative to control cells. This means that in the CHP-134 and Kelly neuroblastoma lines, the use of the Aurora A kinase inhibitor causes a decrease in the level of ATP in the cells of these lines. In order to draw further conclusions, it would be necessary to repeat the experiment using other neuroblastoma cell lines, as well as perform a more thorough statistical analysis. This would allow for more specific targeting of further research focused on finding drugs for neuroblastoma treatment.