Impact of the ch14.18/CHO antibodies, which bind to ganglioside GD2, on the MSX1 gene expression level and cell viability of human neuroblastoma IMR-32 cell line

Neuroblastoma jest częstym nowotworem wieku dziecięcego. Komórki nowotworowe charakteryzuje obecność gangliozydu GD2 na ich powierzchni. Występowanie tej cząsteczki ogranicza się głownie do układu nerwowego i stanowi niewielki procent wśród wszystkich gangliozydów obecnych na zdrowych komórkach nerwowych. Sprawia to, że gangliozyd GD2 jest dobrym celem dla terapii z wykorzystaniem przeciwciał monoklonalnych.W niniejszej pracy sprawdzono wpływ przeciwciał ch14.18/CHO wiążących tenże gangliozyd na komórki neuroblastoma linii komórkowej IMR-32. Przeprowadzone badania pozwoliły na sprawdzenie zmian morfologicznych oraz zmian w żywotności komórek IMR-32 na skutek inkubacji z tym przeciwciałem. Kolejna część pracy skupiona jest na analizie, czy wspomniane przeciwciało wpływa na poziom mRNA genu MSX1 oraz poziom białka TLX2. Przeprowadzono również analizę bioinformatyczną z wykorzystaniem platformy R2, która pozwoliła na skorelowanie poziomu transkrypcji genów MSX1 i TLX2 z innymi czynnikami prognostycznymi w neuroblastoma takimi jak: wiek pacjenta w momencie diagnozy, amplifikacja MYCN, poziom ryzyka nowotworu oraz stadium INSS.

Neuroblastoma is common tumor of childhood. It is characterized by presence of GD2 ganglioside on the surface of tumor cells. The occurrence of this molecule is restricted mainly to nervous system and represents a small amount of all gangliosides present on nerve cells. It makes ganglioside GD2 a good target for therapy with application of monoclonal antibodies. In this work was examined impact of ch14.18/CHO antibodies, which bind to ganglioside GD2, on the neuroblastoma IMR-32 cell line. Conducted research allowed to check morphology and changes in viability of IMR-32 cells as a result of incubation with the mentioned antibody. The next part of the work is based on analyzes if ch14.18/CHO antibody has any impact on mRNA level of the MSX1 gene and also level of the TLX2 protein. Bioiformatic analyzes using R2 platform was also conducted. It allowed to corelate transcription levels of the MSX1 and TLX2 genes with another factors as: the age at diagnosis, MYCN amplification, the risk category or the INSS stage.