Study of the photoreactivity of the lipid extract from Bruchs membranes

This bachelor thesis presents characteristics of the human Bruch’s membrane (BM). Special attention was paid to BM’s anatomical structure, molecular composition and its importance as an integral part of the blood-retina barrier and aging process. This work considers also mechanisms underlying changes occurring with age within the Bruch’s membrane. Age-related macular degeneration, a disease associated with BM’s changes was also mentioned. During this work, lipid extraction was performed from a selected human Bruch’s membranes isolated from the eyeballs of the elderly donors. The Folch method, which enables efficient extraction of hydrophobic components, mainly lipids, from tissues was employed. In order to evaluate the photochemical properties of the BM’s lipid extract, a series of measurements using biophysical methods was performed. The ability of BM’s extract to generate reactive oxygen species upon visible light irradiation was studied. Research results and conclusions are presented in the last part of the thesis.

Niniejszą pracę licencjacką poświęcono charakterystyce błony Brucha (BM, ang. Bruch’s membrane). Szczególną uwagę skupiono na jej budowie i składzie molekularnym, znaczeniu jako integralnej części bariery krew-siatkówka oraz procesie starzenia się. Ponadto zwrócono uwagę na mechanizmy leżące u podstawy zmian zachodzących z wiekiem w obrębie BM. Poruszono również tematykę zwyrodnienia plamki żółtej (AMD, ang. Age-related macular degeneration), schorzenia, w którym zmiany zachodzące w obrębie BM zdają się mieć istotne znaczenie. Podczas przygotowania pracy przeprowadzono ekstrakcję lipidów z wybranych ludzkich błon Brucha pochodzących z gałek ocznych dawców w podeszłym wieku. W tym celu zastosowano metodę Folcha, która pozwala na efektywną ekstrakcję hydrofobowych składników, głównie lipidów, z tkanek. Następnie przeprowadzono szereg pomiarów przy użyciu metod biofizycznych pozwalających na ocenę własności fotochemicznych ekstraktu, a w szczególności zdolności do generowania reaktywnych form tlenu pod wpływem światła widzialnego. Wyniki badań i wnioski z doświadczeń przedstawiono w ostatniej części pracy.