Ocena wpływu wybranych parametrów eksperymentalnych na charakterystykę analityczną układu CE-C4D

Celem badań była ocena wpływu różnych parametrów eksperymentalnych na powtarzalność wyników analizy wykonanej za pomocą układu CE-C4D. Pomiary zostały wykonane przy użyciu przenośnego zestawu do elektroforezy kapilarnej ze sprzężonym pojemnościowo bezkontaktowym detektorem konduktometrycznym i ręcznym nastrzykiem. Jako elektrolit podstawowy zastosowano bufor octanowy. Analitami były skopolamina i atropina, a jako wzorzec wewnętrzny zastosowano prokainę. W trakcie pomiarów użyto niepowlekaną kapilarę ze stopionej krzemionki o całkowitej długości równej 30 cm i długości efektywnej wynoszącej 18,4 cm. Do układu było przykładane napięcie wynoszące 11,3 kV. Sprawdzono jak błędy popełnione w trakcie ręcznego wprowadzania próbki do kapilary wpływają na powtarzalność wyników. W tym celu zbadano efekty wynikające z różnego czasu nastrzyku próbki oraz różnej długości przerwy pomiędzy nastrzykiem a przyłożeniem napięcia. Oceniono również jak przygotowanie układu poprzez dodatkowe kondycjonowanie kapilary w postaci przykładania napięcia wpływa na powtarzalność wyników. Pomiary wykonano również przy włączonej i wyłączonej klimatyzacji w celu sprawdzenia, czy ruch powietrza wpływa na pracę układu. Analizę wyników przeprowadzono za pomocą testów statystycznych zakładając poziom istotności α=0,05. Otrzymane wyniki pokazały, że powtarzalność można poprawić poprzez przykładanie napięcia jako dodatkowy etap kondycjonowania. Występowanie przerwy pomiędzy nastrzykiem a przyłożeniem napięcia zmniejsza czułość metody. Praca klimatyzacji nie wpływa na stabilność układu, co niesie nadzieję, że układ można wykorzystywać poza laboratorium.

The aim of the research was to evaluate the influence of various experimental parameters on the analytical performance of the electrophoretic analysis. Measurements were made using a portable capillary electrophoresis system with a capacitively coupled contactless conductivity detector and manual injection. An acetate buffer was used as the background electrolyte. Analytes were scopolamine and atropine, while procaine was used as an internal standard. During the measurements, an uncoated fused silica capillary with a total length of 30 cm and an effective length of 18.4 cm was used. A voltage of 11.3 kV was applied to the system. During the experiments, it was checked how operator’s mistakes done during the manual injection of the sample into the capillary affect the reproducibility of the results. For this purpose, effects of altering the injection time and duration of the time gap between injection and application of the separation voltage were investigated. It was also assessed how the system preparation by preconditioning the capillary using the additional voltage influences the reproducibility of the results. Moreover, measurements were also made with the air conditioning turned on and off in order to check whether the air movement affects the operation of the system. The analysis of the results was performed using statistical tests, assuming the significance level of α = 0.05. The obtained results showed that the reproducibility could be improved by applying voltage as an additional conditioning step. The occurrence of a time gap between the injection and the application of separation voltage reduces the sensitivity of the method. The operation of the air conditioning system does not affect the stability of the system, which suggest that the system could be used outside the laboratory.