Testing of PD-L1 inhibitors using novel Jurkat model cells

The aim of this master thesis was to test the activity of various inhibitors of PD-L1 protein using two types of Jurkat cells, which are immortalized human T lymphocytes, and hamster ovarian tumor cells (CHO). The tested compounds were biphenyl derivatives - Compound A, BMS-1166, PD-157, MK-112, and a peptide mimetic - peptide-57. Their performance was tested on Jurkat cells supplied by Promega and the C19E2 clone obtained in our laboratory by a transfection and selection procedure. The activities of the inhibitors were determined on the basis of the results attained by the performed bio-test "PD-1/PD-L1 Blockade Bioassay" developed by the American company Promega. The influence of the media on the activity of the tested compounds and on the viability of the cells was also investigated. The results of this thesis show which of the tested inhibitors shows the highest inhibition of the PD-L1 protein and has the greatest potential to block the PD-1/PD-L1 immune checkpoint.

Niniejsza praca miała na celu sprawdzenie aktywności różnych inhibitorów białka PD-L1 wykorzystując przy tym dwa rodzaje komórek Jurkat, czyli unieśmiertelnionych limfocytów T ludzkiego pochodzenia i chomiczych komórek nowotworu Jajnika (CHO). Badanymi związkami były pochodne bifenylowe – Compound A, BMS-1166, PD-157, MK-112 i mimetyk peptydowy – peptide-57. Ich działanie testowano na komórkach Jurkat dostarczonych przez firmę Promega oraz otrzymany w naszym laboratorium przez transfekcję klon C19E2. Aktywności inhibitorów zostały określone za pomocą wyników otrzymanych poprzez wykonany bio-test „PD-1/PD-L1 Blockade Bioassay” opracowany przez amerykańską firmę Promega. Sprawdzono również wpływ pożywek na działanie badanych związków i na żywotność komórek. Otrzymane wyniki ukazują, który z badanych inhibitorów wykazuje najwyższą inhibicję białka PD-L1 oraz ma największy potencjał blokujący immunologiczny punkt kontrolny PD-1/PD-L1.