Assessment of the level of PHLDA1 gene silencing in IMR-32 human neuroblastoma cells

Neuroblastoma jest najczęściej wykrywanym nowotworem u dzieci w ciągu pierwszego roku życia. Cały czas są prowadzone badania mające na celu pogłębienie wiedzy na temat mechanizmów molekularnych prowadzących do tego nowotworu w celu opracowania skuteczniejszych sposobów leczenia. Dużą nadzieję wiąże się z terapią celowaną, która ograniczyłaby cytotoksyczny wpływ leków na zdrowe komórki. Przykładem takiego podejścia jest zastosowanie monoklonalnych przeciwciał 14G2a przeciwko gangliozydowi GD2, które wiążą się z licznie występującym gangliozydem GD2 na powierzchni komórek neuroblastoma i prowadzą min. do wzrostu poziomu białka PHLDA1 i sprowadzenia komórek nowotworowych na drogę apoptozy. Białko to wykazuje przeciwstawne działanie, w zależności od typu komórek nowotworowych. Celem pracy była ocena poziomu wyciszenia genu PHLDA1 w ludzkich komórkach neuroblastoma linii IMR-32 za pomocą PCR w czasie rzeczywistym. Sprawdzenie wyciszenia ekspresji tego genu pozwoli w przyszłości na zbadanie roli białka PHLDA1 w komórkach neuroblastoma oraz jego wpływu na poziom innych białek.

Neuroblastoma is the most common cancer in children. Research is constantly being carried out to deepen our understanding of the molecular mechanisms behind this cancer in order to develop more effective treatments. High hopes are attached to targeted therapy, which would reduce the cytotoxic effect of drugs on healthy cells. An example of such approach is the use of anti-ganglioside GD2 14G2a monoclonal antibodies, which bind to the abundant GD2 ganglioside on the surface of neuroblastoma cells and lead to increase in the level of PHLDA1 protein, bringing cancer cells on the path of apoptosis. PHLDA1 has opposite effects depending on the type of cancer. The aim of the study was to evaluate the level of silencing of the PHLDA1 gene in human IMR-32 neuroblastoma cells using qPCR. The verification of the PHLDA1 silencing will allow to study the role of PHLDA1 protein in neuroblastoma and its impact on the level of other proteins.